大鼠骨钙素elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠骨钙素（oc）水平。用纯化的大鼠骨钙素（oc）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入骨钙素（oc），再与hrp标记的骨钙素（oc）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物tmb显色。tmb在hrp酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠骨钙素（oc）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（od值），通过标准曲线计算样品中大鼠骨钙素（oc）浓度。
大鼠骨钙素elisa试剂盒组成
1
20倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
3ml×1瓶
2
酶标试剂
3ml×1瓶
8
标准品（3200ng/l）
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×4条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
3ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂a液
3ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂b液
3ml×1/瓶
12
密封袋
1个
大鼠骨钙素elisa试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1600ng/l
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
800ng/l
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
400ng/l
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
200ng/l
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
100ng/l
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。