液相色谱仪的品、种类很多，各的使用方法也不尽样，主要看你是那款的液相色谱仪，当初购买设备时，厂的工程师会培训使用方法。效液相色谱仪与结构仪器的联用是个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等；液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类，海水中的不挥发烃类，使环境污染分析得到新的发展。
液相色谱仪的使用方法：
内容：
1 开机
1.1 打开电脑。
1.2 打开液相色谱各个模块的电源。
1.3 双击桌面“仪器—联机，进入联机界面。
1.4 排气：
1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）。
1.4.2 右键单击“泵图标区域，选择“方法…选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min（般为3－5ml/min），点击“确定。
1.4.3 右键单击“泵 图标，点击“控制…选项，选中“on，点击“确定，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
1.4.4 右键单击“泵 图标，点击“方法…选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。
1.4.5 右键单击“泵图标，点击“方法…选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。
1.4.6 同理右键单击“柱温箱，“检测器图标，点击“方法…选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制 选项，“on打开柱温箱和检测器。
2 编辑方法
2.1 点击“方法－“编辑完整方法开始编辑完整方法。
2.2 选中除“数据分析 外的三项，进入下选项卡。
2.3 方法信息：在“方法注释中加入方法的信息（如：this is for test！）。进入下选项卡。
2.4 泵参数设定：在“流速处输入流量， 如1.0ml/min，停止时间：如10 min（该停止时间仅为做个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，a为水，b为乙腈，则设置b：75％即可。进入下选项卡。
2.5 自动进样器参数设定： 选择“洗针进样----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下选项卡。
2.6 柱温箱参数设定： 在“温度下面的空白方框内输入所需温度，如：40度。进入下选项卡。
2.7 uv检测器参数设定： 在“波长下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm。点击确定。
2.8 在“ 运行时选项表 中，选中“ 数据采集，点击“确定。
2.9 从“方法菜单，选中“方法另存为…，输入方法名，如“测试，点击“确定。
3 单次采集
3.1 从“运行控制菜单中，选择“样品信息选项，选择合适的路径，在“数据文件中选择 “前缀/计数器，输入样品瓶的位置，点击“确定。
3.2 基线平稳后约10分钟，从“运行控制菜单中选择“运行方法。
4 多次数据采集
4.1 按照步骤2 编辑完整方法。
4.2 点击“序列－“序列表，输入“样品瓶“样品名称，“进样次数，选择合适的“做样方法
4.3 点击“序列－“序列参数，选择序列数据的保存路径（序列会自动生成以“序列名称－时间为名称的文件夹保存数据），数据建议以选择 “前缀/计数器保存。
4.4 从“序列菜单，选中“序列另存为…，输入序列名，如“测试，点击“确定。
4.5 从“运行控制菜单中选择“运行序列。
5 数据分析（脱机状态使用）
5.1 双击“仪器 —脱机图标 进入的脱机画面。
5.2 从“视图菜单中，点击“数据分析进入数据分析画面。
5.3 从“文件菜单选择“调用信号，选中您的数据文件名。点击“ 确定，则数据被调出。（如预建立标准曲线，应先打开浓度较低的标样图谱。）
5.4 做谱图化：从“图形菜单中选择“信号选项。从“范围 中选择“满量程 或“自动量程 及合适的时间范围或选择“自定义量程 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“ 确定。
6 积分：
6.1 从“积分菜单中选择“积分事件选项，选择合适的“斜率灵敏度，“峰宽，“小峰面积，“小峰。点击 ，自动加载积分参数。
6.2 点击左边“√图标，将积分参数存入方法并退出“积分事件。
6.3 如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
7 标准曲线
7.1 点击“校正－“校正设置，输入“含量单位。
7.2 点击“校正－“新建校正表，点击确定。输入“化合物名称和“含量，点击“确定，按照提示删除其他组分。
7.3 至此完成单校正，如要增加校正别，应从“文件菜单选择“调用信号，选中您的数据文件名（第个标样），点击“校正－“添加别，点击确定，输入“含量，依次增加校正别。
8 打印报告
8.1 从“报告菜单中选择“设定报告选项，点击“定量结果框中“定量右侧的黑三角，选中“外标法，其它选项不变，点击“ 确定。
8.2 从“报告菜单中选择“打印报告，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告 底部的“打印钮。
8.3 点击“文件－“另存为－“方法，把数据分析方法保存，下次分析可直接在“文件－“调用－“方法下，将该方法调出使用。（调用的方法中含有积分方法，标准曲线方法和打印报告方法）
9 关机
9.1 关机前，先关紫外灯，用相应的溶剂（甲醇或乙腈）充分冲洗系统大约30分钟。（色谱柱终应保存在甲醇或乙腈中）
9.2 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。
9.3 关闭agilent 1260各模块电源开关。
10 其它注意事项
10.1 当样品运行时，切勿打开自动进样器前遮盖，否则进样过程停止。
10.2 系统发生漏液时，机器会检测到并停止进样，状态指示灯为红色。检查擦干并安置好漏液处，擦干漏液传感器，单击on按钮，系统重新初始化。
10.3 注意紫外灯使用寿命，切勿来回开关紫外灯。
效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，hplc所达到的分辨率和灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离hplc成为解决生化分析问题有前途的方法。由于hplc具有分辨率、灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种域。
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