色谱流动相的制备： 1 m乙酸铵溶液：称取77 g乙酸铵，溶于1 l hplc级的水中。 流动相a：在1 l水 (hplc级) 中加入5 ml 1 m乙酸铵溶液。 流动相b：在1 l甲醇 (hplc级) 中加入5 ml 1 m乙酸铵溶液
样品制备 基于berthiller等人提出的方法[1]： 1．称量10 g匀浆的样品； 2．加入5 µl浓度100 µg/ml的zan的乙腈溶液； 3．加入40 ml乙腈 / 水(84 / 16)； 4．在自动振摇器以180 r/min的速度振摇提取90 min; 5．过滤提取液(s&s折叠过滤器, 595 ½, whatman schleicher & schuell)； 6．转移8 ml提取液到样品管中； 7．将mycosep226#和227# (romer实验室)推入样品管(*使用226#，极性适应范围宽，但hplc进样 4～5次后，应用流动相b相冲洗色谱柱10 min；若使用227#，zon会滞留在色谱柱上，且niv的回收率也 较低)； 8．将4 ml经过纯化的提取液移入样品管； 9．n2 流保护下，50 ℃温和加热挥干溶剂； 10．将残留物溶于1 ml色谱流动相a相中，涡流混合均匀； 11．0.22 µm滤膜（millipore）过滤后，备用。
色谱分离条件 agilent 1100 系统：g1312a二元泵系统、g1367a型自动进样器、柱温箱。 色谱柱：thermo electron aquasil，c18柱， 150 mm×4.6 mm，3 µm。 流动相：a相—水 + 5 mm 甲酸铵；b相—甲醇 + 5 mm 甲酸铵
ms/ms检测： api 3200™或3200 qtrap® lc-ms/ms液质分析系统。turboionspray® 离子源，mrm扫描方式。 period 1 (0～5 min)：负离子模式：