海洋微生物菌种实验中的操作要点
1、加样
在elisa中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在leisa板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。 加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法elisa)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
2、标本的采取和保存
可用作elisa测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分elisa检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在elisa中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以hrp为标记的elisa测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性hrp,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法elisa中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
3、试剂的准备
按elisa试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。elisa试剂盒elisa中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用ph计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
海洋微生物菌种牛β内啡肽(β-ep)elisa kit 英文名: bovine beta-endorphin,β-ep elisa kit
牛β干扰素(ifn-β/ifnb)elisa kit 英文名: bovine interferon β,ifn-β/ifnb elisa kit
牛β-防御素(β-defensins)elisa kit 英文名: bovine β-defensins elisa kit
牛α乳清蛋白(α-la)elisa kit 英文名: bovine α lactalbumin,α-la elisa kit
牛α晶体b链(cryab)elisa kit 英文名: bovine alpha-crystallin b chain,cryab elisa kit
牛α干扰素(ifn-α)elisa kit 英文名: bovine interferon α,ifn-α elisa kit
牛α1酸性糖蛋白(α1-agp)elisa kit 英文名: bovine α1-acid glycoprotein,α1-agp elisa kit
牛p物质(sp)elisa kit 英文名: bovine substance p,sp elisa kit
牛n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶(nag)elisa kit 英文名: bovine n-acetyl-β-d-glucosaminidase,nag elisa kit
牛n端前脑钠素(nt-probnp)elisa kit 英文名: bovine n-terminal pro-brain natriuretic peptide,nt-probnp elisa kit
牛d-乳酸elisa kit 英文名: bovine d-lactic acid elisa kit
牛c肽(c-peptide)elisa kit 英文名: bovine c-peptide elisa kit
牛c反应蛋白(crp)elisa kit 英文名: bovine c-reactive protein,crp elisa kit
牛5羟色铵/血清素/血清铵(5ht/st)elisa kit 英文名: bovine 5-hydroxytryptamine/serotonin,5ht/st elisa kit
牛ⅲ型前胶原氨基末端肽(pⅲnp)elisa kit 英文名: bovine n-terminal procollagen ⅲ propeptide,pⅲnp elisa kit
牛1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ζ1(plcz1)elisa kit 英文名: bovine 1-phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate phosphodiesterase zeta-1(plcz1)elisa kit
牛17羟孕酮(17-ohp)elisa kit 英文名: bovine 17-hydroxyprogesterone,17-ohp elisa kit
牛1,25二羟基*3(1,25 dhvd3)elisa kit 英文名: bovine 1,25-dihydroxyvitamin d3(1,25 dhvd3)elisa kit
绵羊elisa kit 英文名:
绵羊组铵(his)elisa kit 英文名: sheep histamine,his elisa kit
绵羊肿瘤坏死因子α(tnf-α)elisa kit 英文名: sheep tumor necrosis factor α,tnf-α elisa kit
绵羊中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(ngal)elisa kit 英文名: sheep neutrophil gelatinase-associated lipocalin,ngal elisa kit
绵羊脂联素(adipoq)elisa kit 英文名: sheep adiponectin,adipoq elisa kit
绵羊孕酮受体(pgr)elisa kit 英文名: sheep progesterone receptor,pgr elisa kit
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