细胞凋亡检测染液制备:
1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;
2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;
3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;
4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;
5. 取9份ph6.80—7.38的sorensen缓冲液和1份吉姆萨母液混合即得染色液。
贴壁细胞染色步骤:
1. 去除培养器皿内的培养液,用*反复漂洗单层培养物2次;
2. 加入*,再逐滴加入等体积甲醇,边加边混合,静置10min;
3. 将50%甲醇-bss混合液丢弃,加入新鲜的甲醇液浸泡固定细胞10min,然后用甲醇漂洗细胞1次;
4. 将瓶内细胞干燥后储存或直接染色;
5. 按2ml/cm2 的比例滴加吉姆萨染液,覆盖细胞层,染色2min;
6. 移除染液,用自来水冲洗掉粉红色背景后,再用去离子水冲洗细胞;
7. 用显微镜观察单层潮湿细胞。若细胞已干,可重新使细胞潮湿后再观察。
结果:
细胞凋亡检测核被染成紫红色或紫蓝色,而细胞质则被染成浅红色。
吉姆萨染色法注意事项:
1. 染液宜现用现配,旧染液染色效果不佳。染液保存时间不宜超过48h;
2. 吉姆萨对ph极敏感,因此,缓冲液ph要准确,否则染色效果不佳。如用染色缸染色时,随染色时间的延长,在染液表面常形成一层氧化膜(发亮)易附着在玻片上形成污秽,且不易除掉。因此在用染色缸染色,尤其用的不是现配者时,染色前应先用小片滤纸刮除液面的氧化层再进行染色。染色完毕,应把标本浸入水中漂洗染液。
人铁蛋白(fe)elisa试剂盒 进口/分装 human ferritin,fe elisa kit
人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(timp-1)elisa试剂盒 进口/分装 human tissue inhibitor of metal protease 1,timp-1 elisa kit
人髓鞘碱性蛋白抗体(mbp)elisa试剂盒 进口/分装 human myelin basic protein autoantibody,mbp elisa kit
人组织多肽抗原(tpa)elisa试剂盒 进口/分装 human tissue polypeptide antigen,tpa elisa kit
人肺癌标志物elisa试剂盒 进口/分装 human lung cancer marker elisa kit
人胃癌标志物elisa试剂盒 进口/分装 human gastric carcinoma marker elisa kit细胞凋亡检测