hg/t 4323-2012 循环冷却水中军团菌的检测与计数仪器试剂hg/t 4323-2012 循环冷却水中军团菌的检测与计数仪器试剂hg/t 4323-2012 循环冷却水中军团菌的检测与计数仪器试剂 军团菌是一类菌种的总称，为革兰阴性杆形菌，两端钝圆，有鞭毛，无芽孢和荚膜，，有41个种属、61个血清型。其中嗜肺军团菌有15个血清 型，是引起军团菌病的主要菌型。
4 安全 本标准规定的检测应符合gb/t27403并应在二级隔离的生物实验室（bsl-2）完成，检出军团菌 的样品及培养基应经过无害化处理。
5循环冷却水中军团菌的检测与计数方法提要 循环冷却水中军团菌数目一般达不到直接涂布检测的数目（105cfu／l），应通过膜过滤或离心方式 浓缩水样中的微生物。为了减少杂菌对军团菌生长的抑制作用，对浓缩的微生物进行酸处理或热处理。 将浓缩后的试样或滤膜转移到对军团菌具有选择性的gvpc培养基上培养，生长的菌落为疑似军团菌。军团菌的典型特性是在活性炭一酵母提取液培养基（bcye）生长而在l－半缺失的bcye培 养基（bcye-cys）不生长。利用这一特性将疑似军团菌在bcye和bcye-cys两种培养基上进行培 养，根据生长情况来确定是否为军团菌。
6hg/t 4323-2012 循环冷却水中军团菌的检测与计数试剂和材料
6.1本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和符合gb/t6682三级水的规定。
6.2活性炭一酵母提取液培养基（bcye培养基）：按附录b中b.1制备。
6.3 半缺失的bcye培养基（bcye-cys培养基）：见附录ｂ中ｂ，２。
6.4选择性培养基（gvpc培养基）：按附录ｂ中ｂ．３制备。
6.5酸缓冲液：按附录b中b.4制各。
6.6ｐａｇｅ’盐：按附录b中b.5制备。
6.7氧化酶试剂。
6.8硝酸盐培养基。
6.9尿素琼脂
6.10营养明胶
6.11马尿酸水解试剂
6.12军团菌胶乳凝集试剂盒。
７hg/t 4323-2012 循环冷却水中军团菌的检测与计数仪器、设备
7.1真空过滤系统。
7.2微孔滤膜：直径为47mm~50mm ，孔径为0.22μｍ～0.45μｍ。
7.3黑色硝化纤维膜：直径为47mm~50mm，孔径为0.22μｍ～0.45μｍ。
7.4接种环：d3mm。
7.5超声波振荡器。
7.6涂布器。
7.7无菌平皿：直径为90mm。
7.8co2培养箱：（36±1℃）。
7.9紫外线灯：波长为360nm±20nm。
7.10无菌镊子。
7.11低倍双目显微镜。
7.12微量可调移液器：100μl，300μl。
7.13离心机：转速为0~8000r/min ，带有300ｍｌ～500ｍｌ具螺旋盖的离心瓶。
水样采集及检测步骤详见 中华人民共和国化工行业标准hg_t 4323-2012 循环冷却水中军团菌的检测与计数(2012-11-07发布，2013-03-01实施)
备注：军团菌生化鉴定套装中包含 硝酸盐培养基，尿素琼脂，营养明胶，马尿酸水解试剂等试剂。
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