快速限制性内切酶质量控制
产品描述
funicut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5~15 min内精确完成dna切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒dna、pcr产物、基因组dna等。funicut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
识别位置
5'-↓gatc-3'
3'-ctag↑-5'
推荐反应条件
1× funicut™ 缓冲液；
最适37°c孵育。
失活条件
80°c孵育20 min。
注意事项
1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；
2）受dam甲基化影响，序列完-全重叠，剪切阻断；
3）受ecobi甲基化影响，序列可能重叠，剪切阻断；
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；
5）本产品仅作科研用途！
质量控制
1. 功能活性检测：最适反应温度下，在20 μl反应体系中，1 μl酶能够在15 min内完-全消化1 μg λdna (dam-)。
2. 超长时间孵育检测：最适反应温度下，将1 μl酶与1 μg λdna (dam-)共孵育3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，但延长孵育时间可能出现星号活性。
3. 酶切-连接-再酶切检测：最适反应温度下，使用1 μl酶消化底物，回收酶切产物，在22°c下使用适量t4 dna连接酶可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
4. 非特异性内切酶活性检测：最适反应温度下，将1 μl酶与1 μg超螺旋质粒dna共同孵育4 h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，质粒dna仍然处于超螺旋状态。