神经突出相关蛋白slitrk1抗体的生wu素化标记实验要点:
1. 新型血小板相关内皮分泌蛋白scube1抗体费用 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/l碳酸qing钠缓冲液或0.5mol/l硼酸缓冲液充分透析;
2.所用的nhsb及待生wu素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;
3.用nhsb量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生wu素化不足,此时可加入去污剂如 triton x-100, tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生wu素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生wu素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及ben酚基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生wu素会对生wu素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
小鼠凋亡相关因子配体(mouse fas ligand)
小鼠酸性成纤维生长因子(mouse a-fgf)
小鼠碱性成纤维生长因子(mouse b-fgf/fgf-2)
小鼠fibronectin（mouse fibronectin）
小鼠flt3(mouse flt3)
小鼠flt3配体(mouse flt3 ligand)
小鼠纤维连结蛋白(mous fn)
小鼠fractalkine（mouse fractalkine）
小鼠纤维蛋白原(mouse fibrinogen)
小鼠foxp3(mouse foxp3)
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse galectin-9)
小鼠胃泌素(mouse gastrin)
小鼠ghrelin(mouse ghrelin)
小鼠胰高血糖素样肽-1(mouse glp-1)
小鼠胰高血糖素(mouse glucagon)
小鼠gro(mouse gro)
小鼠神经胶质细胞衍化营养因子(mouse gdnf)
小鼠生长因子(mouse gh)
小鼠心肌转录因子3(mouse gata3)
小鼠心肌转录因子4(mouse gata4)
小鼠低氧诱导因子1α(mouse hif-1α)