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林业菌种实验步骤及注意事项的资料

林业菌种实验步骤及注意事项的资料
1. 把聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质电泳转移到硝酸纤维膜上。
1)转移缓冲液洗涤凝胶和硝酸纤维素膜,将硝酸纤维素膜铺在凝胶上,用5ml移液管在凝胶上来回滚动去除所有的气泡。
2)在凝胶/滤膜外再包一张3mm滤纸(预先用转移缓冲液浸湿),将凝胶夹在中间,保持湿润和没有气泡。
3)将此滤纸/凝胶/薄膜滤纸按照厂家建议方法放入电泳装置中,凝胶面向阴极。
4)将上述装置放入缓冲液槽中,并灌满转移缓冲液以淹没凝胶。
5)按照厂家所示接通电源开始电泳转移。
6)转移结束后,取出薄膜和凝胶,弃去凝胶。
2. 将薄膜漂在氨基黑中快速染色,直至分子量标准显现时取出,记录下标准位置。
3. 用100ml水洗涤纤维素膜,必要时可用脱色缓冲液。
4. 膜置印迹缓冲液中于37℃保温1小时。
5. 室温下,用pbs-tween缓冲液洗涤薄膜。
6. 用封口机将薄膜封入塑料袋中,尽可能不留空气。
7.袋的一角剪一缓冲液的小口,用透析袋夹紧。
8.混合:ngs(100微升),印迹缓冲液中的抗体(10毫升),加在装薄膜的袋中,于室温下摇动2小时(或4℃过夜)
9.用总体积300ml pbs-tween缓冲液,分4次在一浅盘中洗涤薄膜,每次75ml。
10. 将连接*的羊抗兔igg(40微升溶于10毫升印迹缓冲液/100微升 ngs)加在袋内,于室温下摇动1小时。
11.按步骤9洗涤。
12.加入抗生素(antibiotic)蛋白-hrp(40微升溶于10毫升印迹缓冲液/100微升 ngs),于室温下摇动。
林业菌种芳犬尿氨酸甲酰胺酶(afmid)elisa试剂盒 ,英文名: afmid elisa kit
芳基硫酸酯酶k(arsk)elisa试剂盒 ,英文名: arsk elisa kit
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泛酸激酶3(pank3)elisa试剂盒 ,英文名: pank3 elisa kit
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