for research use only
仅供研究用
货号:qys-234052
果糖(fructose ,ft)含量试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
果糖是一种zui为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是zui甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。
果糖(fructose ,ft)含量试剂盒说明书测定原理:
在酸性条件下果糖与*反应,生成有色物质,在 480nm 下有特征吸收峰。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100ml×1 瓶,4℃保存;
试剂一:1mg/ml 标准液 10ml×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 40ml×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 15ml×1 瓶, 4℃保存;
试剂四:粉剂 0.5g×1 瓶,常温保存。
果糖提取:
称取 0.1~0.2g 样本,常温研碎;加入 1ml 提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于 80℃水浴锅中 10min(盖紧,以防止水分散失),振荡 3~5 次,冷却后,4000g,25℃离心 10min,取上清;加入少量(约 2mg)试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入 1ml 提取液,4000g,25℃离心 10min,取上清液测定。
果糖(fructose ,ft)含量试剂盒说明书测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(在 1.5ml ep 管中依次加入下列试剂):
试剂(μl) 空白管 标准管 测定管
样本 100
试剂一 100
蒸馏水 100
试剂二 700 700 700
试剂三 200 200 200
混匀,95℃水浴反应 30min(盖紧,以防止水分散失),冷却后测定 480nm 处光吸收值,空白管、标准管和测定管分别记为 a1、a2 和 a3。
果糖含量计算:
1、果糖含量(mg/mg prot)=(c 标准管×v1)×(a3-a1)÷(a2-a1) ÷(v1×cpr)= (a3-a1)÷
(a2-a1) ÷cpr
果糖(fructose ,ft)含量试剂盒说明书此法需要自行测定蛋白浓度。
2、果糖含量(mg/g 鲜重)=(c 标准管×v1)×(a3-a1) ÷(a2-a1) ÷(w×v1÷v2)= 2× (a3-a1) ÷(a2-a1) ÷w。
c 标准管:标准管浓度,1mg/ml;v1:加入样本体积,0.1ml;v2:加入提取液体积,2ml;
cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;w:样本鲜重,g。
注意:zui低检测限为 100ng/g 鲜重或 1ng/mg prot
