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为比较3种抗牛支原体(m.bovis)血清抗体的elisa试剂盒检测效果,elisa试剂盒本实验应用3种检测m.bovis血清抗体elisa诊断试剂盒对38份阳性样品(天然感染19份,人工感染18份)和37份阴性样品进行检测。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od值),与cutoff值比拟较,从而判断标本中牛支原体的存在与否。elisa试剂盒此外,3种试剂盒对牛传染性肋膜肺炎尺度血清(ps2)的检测结果显示hvri试剂盒和kit 1均为为阴性,kit 2为阳性。因此,hvri试剂盒与kit 1更适于m.bovis检测和开展流行病学调查。用纯化的牛支原体抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中支原体相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与hrp标记的支原体抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经由*洗涤后加底物tmb显色。
牛支原体酶联免疫分析试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(elisa)测定标本中牛支原体。一致性检修结果显示:hvri试剂盒与kit 1的一致性较高;kit 2与hvri试剂盒、kit 2与kit 1有中度的一致性。tmb在hrp酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*的黄色。elisa试剂盒结果表明:本实验室制备的hvri试剂盒与商品化试剂盒kit 1的检测结果和综合检测结果符合率分别达到92%和96%;而商品化试剂盒kit 2的检测结果与综合检测结果符合率仅为74.67%。
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