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液相色谱*充满方式进样,部分峰的重复性比其它峰低的现象排除

液相色谱仪当以*充满方式进样,出现部分峰的重复性比其它峰低的现象,这些有问题的峰的低精度,是由于他们吸附在样品溶液定量环或转子密封圈的内表面而造成的。这种情况比较罕见,只出现在一下情况:
1 用离子对试剂,并非所有样品成分会离子配对;2 样品溶剂的作用弱于流动相。
可以用以下方法测试:分别以20倍和30倍定量环体积进样,进样完毕立即注射,测定有问题的峰面积/无问题的波峰面积的比值。如果3倍体积进样的比值较小,说明有吸附作用存在,这是由于较大的进样体积能够zui大程度的使吸附饱和,降低对样品组分的吸附。
若比值不变,可能未发生吸附作用,否则是因吸附而产生。解决办法是使用与样品溶剂相同的流动相。以同样体积、流速和时间间隔进行进样。
大多数情况下,不锈钢定量环的内表面是不会与任何样品溶液发生反应的。但在很少情况下,样品溶液的吸附性导致了被吸附样品的低精度。下面将说明这种情况是如何发生的。使用*填充方式时,一些样品成分有所分离,附于定量环表面。进入注射后,作用力大于样品溶剂的流动相吸附了这些成分,引起注射入管柱的体积大于应输送的体积。吸附量取决于填充条件,即样品溶剂的作用力轻度、流过定量环的多余体积、进样的流速以及注射前的延迟时间。当进样体积小于定量环体积的1/2时不会发生这种情况,因为所有样品都在定量环内,没有集中在某一处的可能。解决峰低精度这一问题的一个方法是改用部分充填方法。
关键词:液相色谱仪
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